Modh indíreach ELISA a fhorbairt chun antashubstaint IgG de choróinvíreas géar-bhuinneach muc a bhrath bunaithe ar phróitéin spíc athchuingreach

Is coróinvíreas eintreach pataigineach muiceola nua-aimsithe é Coronavirus Siondróm Géar Buinneach Muc (SADS-CoV) a d'fhéadfadh buinneach uisceach a chur faoi deara i bainbh nuabheirthe agus a chuireann faoi deara caillteanais eacnamaíocha suntasacha don tionscal muc.Faoi láthair, níl aon mhodh séireolaíoch oiriúnach ann chun éifeachtacht ionfhabhtaithe agus vacsaíne SADS-CoV a mheas, agus mar sin tá géarghá le measúnacht imdhíon-shuímh einsím-nasctha (ELISA) éifeachtach a úsáid chun an t-easnamh seo a dhéanamh.Anseo, tógadh plasmid athchuingreach a léiríonn próitéin SADS-CoV spike (S) comhleádh le fearann ​​​​IgG Fc daonna chun baculovirus athchuingreach a tháirgeadh agus a chuirtear in iúl i gcealla HEK 293F.Déantar an próitéin S-Fc a íonú le roisín próitéin G agus coinníonn sé an imoibríocht le antasubstaintí frith-dhaonna Fc agus frith-SADS-CoV.Ansin baineadh úsáid as próitéin S-Fc chun ELISA indíreach (S-iELISA) a fhorbairt agus chun coinníollacha imoibrithe S-iELISA a bharrfheabhsú.Mar thoradh air sin, trí anailís a dhéanamh ar luach OD450nm de 40 sera diúltach SADS-CoV arna dhearbhú ag measúnacht imdhíonfhluaraiseachta (IFA) agus blotting an Iarthair, socraíodh gurb é 0.3711 an luach scoite.Bhí comhéifeacht éagsúlachta (CV) na 6 séiream dearfach SADS-CoV laistigh de agus idir raonta S-iELISA ar fad níos lú ná 10%.Léirigh an tástáil tras-imoibríochta nach bhfuil aon tras-imoibríocht ag S-iELISA le sera víreas muc eile.Ina theannta sin, bunaithe ar 111 sampla serum cliniciúil a bhrath, ba é 97.3% ráta foriomlán comhtharlaithe IFA agus S-iELISA.Léirigh an tástáil neodrú víreas le 7 luachanna OD450nm éagsúla de serum go raibh an luach OD450nm braite ag S-iELISA comhghaolú dearfach leis an tástáil neodrú víreas.Ar deireadh, rinneadh S-iELISA ar 300 sampla serum feirme muc.Léirigh feisteáin tráchtála enteroviruses muc eile go raibh rátaí dearfacha IgG de SADS-CoV, TGEV, PDCoV agus PEDV 81.7%, 54%, agus 65.3%, faoi seach., 6%, faoi seach.Léiríonn na torthaí go bhfuil an S-iELISA sonrach, íogair, agus in-atáirgthe, agus is féidir é a úsáid chun ionfhabhtú SADS-CoV a bhrath i dtionscal na muc.Tá an t-alt seo cosanta ag cóipcheart.gach ceart ar cosaint.


Am postála: Meitheamh-22-2021